时隔3年后，韩春雨发布除此以外科研成果论文

时隔3年，曾处于新近闻界旋涡的韩风雨发布新近闻了一项最新近学术研究成果。近日，韩风雨在预稿本FacebookBioRxiv上刊登了一篇关于等位基因编辑的新近文中：Background free tracking of single RNA in living cells using catalytically inactive CasE。文中共有5名写作者，依次为Feng Gao， Yue Sun， Feng Jiang， Xiaoyue Bai， Chunyu Han，临时工基本单位均为河南高科技大学等位基因编辑学术研究之前心。其之前，韩风雨为通讯写作者。据洞察，篇文章之前提到的CasE是Ⅰ-E型 CRISPR复合物的核能心化学物质，它通过为基础特定的枝条环第一区外原则上处理pre-crRNA，引述作 CasE Binding S，简引述为CBS。CasE保守派His20参与选择性，ΔHis26-TtCse3基因的CasE（dCasE）则挽回了选择性，但仍然与其索科利夫卡紧密为基础。在该学术研究之前，通过将 split 红外与dCasE的N末端和C-顶末端（ΔHis20）融合，构建了活体RNA工具箱VN-dCasE-VC。该子系统仅在发挥作用靶RNA时才接获红外，从而增最弱信噪比。在活细胞膜之前进行数据处理的RNA，不需要特定的亚细胞膜分布。CasE-GFP和dCasE-GFP在HEK293T细胞膜之前的高水平表示和都为确实CasE和dCasE适合于活细胞膜之前的RNA操作。为了试验之前CasE在灵长类细胞膜之前表示时是不是有着最弱活性，写作者构建了“关闭”报告等位基因真核细胞CBS-GFP-N1。它由5′-UTR之前的GFP mRNA和CasE为基础位点（CBS）组合成。当CasE被过渡到子系统时，GFP表示水平急剧下降。同时，为了进一步试验之前CasE活性，写作者还构建了“打开”报告等位基因真核细胞RED-16×CBS-Lin28-C1，其之前CBS插入RED结构上等位基因的3′-UTR第一区和Lin28的上游。Lin28是RNA核能保有信号，在其3′-UTR之前有着lin28信号的RED结构上mRNA大部分不可翻译成细胞膜内质。CBS-CasE依赖一般而言退路lin28信号并从核能拘押靶mRNA用作翻译（上图1E和上图1F）。这些确实CasE可以为基础并挤压灵长类细胞膜之前的CBS。另外，为了将dCasE-CBS粒子设计到RNA子系统之前，写作者通过将split-FP5-7与dCasE细胞膜内为基础。发现一个版本，即VN-dCasE-VC无法接获红外，这可能是由于不正确的折叠或起伏不定静止状态，但是当与靶RNA（CBS）为基础时，可以在红外显微镜下相符地捕获红外信号，即使VN-dCasE-VC表示真核细胞的转染剂量非常较低。接下来，写作者使用VN-dCasE-VC子系统灵长类细胞膜之前过表示的β-肌动细胞膜内（β-Actin）的mRNA，VN-dCasE-VC子系统在细胞膜质之前显示出最弱红外。此外还掩蔽到，向靶mRNA添加来得多CBS可加强信号，红外来得清晰，因此，可以通过增加CBS的数量来检验较低丰度的mRNA。总的来说，韩风雨开发团队发明了一种来得进一步RNA工具箱，将其名为为VN-dCasE-VC，该子系统并能活细胞膜之前没有背景的特定RNA，通过红外将其数据处理。目前已有两种活细胞膜RNA显像工具箱，一种是MS2，一种是Cas13a，韩风雨开发团队开发的dCasE子系统，显像敏感度由于MS2，而且，dCasE细胞膜内的聚合度为22kDa，远高于Cas13a的130kDa，dCasE的小聚合度容易递送至细胞膜内，因此来得适合用作活细胞膜的RNA。一位近韩风雨的香港市民透漏：“这篇文中是此前韩风雨临时工的保持一致，目的都是开发等位基因编辑工具箱。”不过，值得注意的是，该学术研究目前刊登于预稿本Facebook，尚不予过不约而同评议，对此，有科研香港市民指出，首发在不予不约而同评议的预稿本上，是为了拿到首发决策权。“韩风雨下一步还会投正式学术期刊的。”前述香港市民确实。不告诉此次来得进一步学术研究成果是不是会再次给韩风雨产生关注，2016年5月初，《其本质—动物核能心技术》刊登韩风雨开发团队来得进一步等位基因编辑核能心技术NgAgo，被新近闻媒体以“甘坐冷板凳、十年憋大招”的故事蓝本炒作而走红，此后半年，韩风雨个人及其所在大学陆续拿到各类名誉和大量教育经费资助，但亦有国内外多名等位基因编辑领域科学家账号发声引述实验结果难以重复，怀疑实验结果的事实。2017年8月初，《其本质—动物核能心技术》刊登题为《是该数据好像的时候了》社论，宣布撤回韩风雨开发团队于2016年5月初2日刊登在该学术期刊的篇文章。2018年9月初，河南高科技大学发布公告，韩风雨开发团队不发挥作用单纯造假。但依据有关规定，取消韩风雨所拿到的荣誉引述号，延后韩风雨开发团队分担的科研项目并发还科研教育经费。韩风雨开发团队回应引述，实验设计发挥作用缺陷、学术研究过程发挥作用着不严谨的问题。有业界香港市民表示：“这波之后，NgAgo这个学术研究朝向在之前国做得较慢。韩风雨他们的临时工开展起来也比较困难，连同学也没有新近招。”